Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Integrin α2/ITGA2/CD49b Double Nickase Plasmid (h): sc-400913-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Integrin α2/ITGA2/CD49b Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Integrin α2/ITGA2/CD49b Double-Nickase-Plasmid (h) und Integrin α2/ITGA2/CD49b Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf ITGA2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Integrin α2/ITGA2/CD49b: sc-74466
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Integrin α2/ITGA2/CD49b Double Nickase Plasmid (h) | sc-400913-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Integrin α2/ITGA2/CD49b Double Nickase Plasmid (h2) | sc-400913-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ITGA2 kodiert Integrin α2 (CD49b), das mit Integrin β1 ein Heterodimer bildet und so den α2β1-Kollagen/Laminin-Rezeptor hervorbringt, der die Zell–Extrazellulärmatrix-Adhäsion und die Mechanotransduktion vermittelt. Über die Kopplung an die Signalübertragung der Focal Adhesion Kinase (FAK), Src-Familien-Kinasen und ein Rho-GTPase-abhängiges Remodeling des Zytoskeletts beeinflusst ITGA2 Zellmigration, Invasion und Überlebensantworten in Abhängigkeit von Zusammensetzung und Steifigkeit der Matrix. In Thrombozyten und anderen Zelltypen unterstützt α2β1 die kollagenabhängige Adhäsion und das „Outside-in“-Signaling von Integrinen, das Aktivierungszustände modulieren kann. Eine dysregulierte ITGA2-Expression oder Integrin-Signalgebung wird häufig im Kontext von Tumor–Stroma-Interaktionen, fibrotischem Umbau, dem Trafficking entzündlicher Zellen und thromboseassoziierten Phänotypen untersucht.
Integrin α2/ITGA2/CD49b Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des ITGA2-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von ITGA2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die ITGA2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit ITGA2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.