Integrin α1/ITGA1/CD49a Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401275

Descripción general

ITGA1 codifica la integrina α1 (CD49a), que forma un heterodímero con la integrina β1 para constituir un receptor de unión a colágeno y laminina que media la adhesión célula–matriz extracelular y la mecanotransducción. Mediante el ensamblaje de adhesiones focales y la señalización a través de las vías FAK/Src, PI3K–AKT y MAPK, la integrina α1 influye en la organización del citoesqueleto, la migración, la proliferación y la supervivencia de manera dependiente del contexto. La actividad de ITGA1 contribuye a la regulación de la remodelación tisular y del posicionamiento de células inflamatorias al modular la dinámica de adhesión y las respuestas transcripcionales downstream. La señalización alterada de integrina α1/β1 se ha asociado con interacciones célula–matriz desreguladas observadas en fibrosis, en la comunicación cruzada tumor–estroma y en la remodelación del microambiente inmunitario, lo que la convierte en una diana útil para estudios centrados en vías de señalización.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Integrin α1/ITGA1/CD49a (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ITGA1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ITGA1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ITGA1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Integrin α1/ITGA1/CD49a.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ITGA1 para la investigación de la señalización de Integrin α1/ITGA1/CD49a, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de ITGA1 críticos para la función de Integrin α1/ITGA1/CD49a
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ITGA1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Integrin α1/ITGA1/CD49a CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Integrin α1/ITGA1/CD49a CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ITGA1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Integrin α1/ITGA1/CD49a (h) y el plásmido HDR Integrin α1/ITGA1/CD49a (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ITGA1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ITGA1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.