Inhibin β-C Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421132

Descripción general

Inhbc codifica la subunidad beta-C de inhibina en ratón, un miembro de la superfamilia TGF-β que puede contribuir a la formación de ligandos activina e inhibina, influyendo así en la señalización dependiente de SMAD. Mediante la modulación de la actividad de la vía TGF-β/activina, la inhibina β-C está implicada en la regulación de programas de diferenciación celular, la homeostasis tisular y el control de la proliferación dependiente del contexto. Un equilibrio alterado de la señalización activina/inhibina se asocia con respuestas inflamatorias y fibróticas desreguladas y se ha vinculado a cambios en procesos reproductivos y endocrinos en múltiples sistemas modelo. En investigación con ratón, Inhbc constituye un nodo manejable para analizar la disponibilidad de ligandos y las respuestas transcripcionales aguas abajo dentro de las redes de la superfamilia TGF-β.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Inhibin β-C (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Inhbc en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Inhbc junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Inhbc tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Inhibin β-C.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Inhbc para la investigación de la señalización de Inhibin β-C, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Inhbc críticos para la función de Inhibin β-C
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Inhbc para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Inhibin β-C CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Inhibin β-C CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Inhbc. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Inhibin β-C (m) y el plásmido HDR Inhibin β-C (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Inhbc para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Inhbc definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.