Inhibin β-A Plasmide Double Nickase (h): sc-402676-NIC

INHBA codifica la subunità beta-A dell’inibina umana, che può omodimerizzare formando l’activina A oppure eterodimerizzare con una subunità alfa formando l’inibina A, importanti regolatori secreti della segnalazione endocrina e paracrina. L’activina A segnala principalmente attraverso recettori di tipo I/II con attività chinasi serina/treonina per attivare SMAD2/3 e modulare programmi trascrizionali che controllano proliferazione e differenziamento cellulare, rimodellamento della matrice extracellulare e risposte infiammatorie. Tramite il crosstalk con le reti della superfamiglia del TGF-β, INHBA influenza la funzione gonadica, l’omeostasi dei tessuti riproduttivi e processi di sviluppo. Un’alterazione della segnalazione INHBA/activina è stata associata a fibrosi, rimodellamento del microambiente tumorale e modifiche del comportamento di cellule immunitarie e stromali, rendendolo un bersaglio rilevante per studi meccanicistici.

Inhibin β-A Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus INHBA nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di INHBA. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di INHBA. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con INHBA interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.