Plásmido Doble Nickase (h) IL-1RAcP: sc-402026-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)IL-1RAcP consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa IL-1RAcP (h) y el plásmido de doble nickasa IL-1RAcP (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a IL1RAP. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: IL-1RAcP Anticuerpo (D-5): sc-376872
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) IL-1RAcP | sc-402026-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) IL-1RAcP | sc-402026-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El IL1RAP humano codifica la proteína accesoria del receptor de IL‑1 (IL‑1RAcP), un correceptor esencial para la señalización de citocinas de la familia de IL‑1, incluida IL‑1α/IL‑1β a través de IL‑1R1 e IL‑33 a través de ST2. Tras la unión del ligando, IL‑1RAcP favorece el ensamblaje del complejo receptor y la señalización dependiente de MyD88 que activa las cascadas de IRAK/TRAF6, lo que conduce a la activación de las vías NF‑κB y MAPK y a la inducción de programas génicos proinflamatorios. A través de estas vías, IL‑1RAcP contribuye a la regulación de la activación de la inmunidad innata, el reclutamiento de leucocitos y los bucles de amplificación de citocinas. La desregulación de la señalización asociada a IL1RAP se ha implicado en la inflamación crónica y la patología inmunomediada, y IL1RAP también se estudia en la comunicación entre el tumor y su microambiente y en la biología de las neoplasias hematológicas.
IL-1RAcP El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus IL1RAP en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de IL1RAP. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de IL1RAP. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con IL1RAP alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.