Plásmido Doble Nickase (h) IL-12Rβ2: sc-406442-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)IL-12Rβ2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa IL-12Rβ2 (h) y el plásmido de doble nickasa IL-12Rβ2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a IL12RB2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: IL-12Rβ2 Anticuerpo (2H6): sc-293379
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) IL-12Rβ2 | sc-406442-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) IL-12Rβ2 | sc-406442-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La IL12RB2 humana codifica la subunidad β2 del receptor de IL-12 (IL-12Rβ2), un componente esencial del complejo receptor de alta afinidad para IL-12 junto con IL12RB1, que se expresa predominantemente en células T activadas y células NK. Tras la unión de IL-12, IL-12Rβ2 media la activación de JAK2/TYK2 y la fosforilación posterior de STAT4, promoviendo la polarización Th1, la producción de IFN-γ y la programación de efectores citotóxicos. Este eje de señalización se integra con redes de citocinas inflamatorias para moldear la inmunidad mediada por células y la inmunovigilancia. La desregulación de la expresión o la señalización de IL12RB2 se ha vinculado con una respuesta inmunitaria alterada en infecciones, autoinmunidad y evasión inmunitaria asociada a tumores, lo que la convierte en un objetivo útil para estudios mecanísticos de diferenciación y función impulsadas por citocinas.
IL-12Rβ2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus IL12RB2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de IL12RB2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de IL12RB2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con IL12RB2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.