Plasmide CRISPR/Cas9 KO IL-11Rα (h): sc-402503
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- IL-11Rα Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique IL-11Rα, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: IL-11Rα Antibody (4D12): sc-130920
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO IL-11Rα (h) | sc-402503 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
L’IL11RA humain code le récepteur alpha de l’interleukine‑11 (IL‑11Rα), une sous‑unité de liaison au ligand qui s’associe au transducteur de signal commun GP130 pour initier la signalisation dépendante de l’IL‑11. La liaison au récepteur active en aval les voies JAK/STAT, MAPK/ERK et PI3K/AKT, influençant des programmes transcriptionnels qui régulent la différenciation cellulaire, la survie et le remodelage tissulaire. L’activité d’IL11RA est impliquée dans la communication stromal‑épithéliale et dans la régulation des réponses inflammatoires et fibrosantes dans de multiples contextes tissulaires. Une signalisation IL‑11Rα dérégulée a été associée à des phénotypes de remodelage pathologique et à des réseaux de signalisation oncogéniques, ce qui en fait une cible pertinente pour des études mécanistiques de la biologie des maladies liées à la fibrose et à l’inflammation.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO IL-11Rα (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène IL11RA dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du IL11RA, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert IL11RA à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine IL-11Rα.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en IL11RA pour l'étude de la signalisation de IL-11Rα, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de IL11RA essentiels à la fonction de IL-11Rα
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de IL11RA pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le IL-11Rα plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le IL-11Rα plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus IL11RA. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le IL-11Rα plasmide HDR (h) et le IL-11Rα (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie IL11RA pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles IL11RA définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.