IGFBP6 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-421067

Übersicht

Igfbp6 kodiert das insulinähnliche Wachstumsfaktor-Bindungsprotein 6 (IGFBP6), einen sezernierten Regulator der Signalübertragung insulinähnlicher Wachstumsfaktoren mit hoher Affinität zu IGF‑II, der die Ligandenverfügbarkeit und die Rezeptoraktivierung moduliert. Durch das Abfangen von IGF‑II und die Beeinflussung seiner Verteilung im extrazellulären Raum kann IGFBP6 die Aktivität der PI3K‑AKT‑ und MAPK‑Signalwege prägen und dadurch Proliferation, Differenzierung, Überleben und metabolische Anpassung beeinflussen. In Mausgeweben trägt die Igfbp6-Expression zu Programmen der Entwicklung und der Gewebehomöostase bei, und eine veränderte IGFBP6-Aktivität wurde in Zusammenhängen untersucht, in denen eine Fehlregulation der IGF-Achse eine Rolle spielt, einschließlich der Krebsbiologie und kardiometabolischer Phänotypen. Seine extrazelluläre Lokalisation macht es zudem relevant für Studien zur parakrinen Kommunikation und zur mikroumgebungsabhängigen Kontrolle der Wachstumsfaktor-Signalgebung.

Das IGFBP6 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Igfbp6-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Igfbp6-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Igfbp6 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die IGFBP6-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Igfbp6-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der IGFBP6-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Igfbp6-Exone abzielen, die für die IGFBP6-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Igfbp6-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom IGFBP6 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom IGFBP6 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Igfbp6-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das IGFBP6 HDR-Plasmid (m) und IGFBP6 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Igfbp6-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Igfbp6-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.