Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO IFRD1 (m): sc-421053
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- IFRD1 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique IFRD1, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: IFRD1 Antibody (D-7): sc-515012
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO IFRD1 (m) | sc-421053 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Ifrd1 (régulateur 1 du développement lié aux interférons ; également connu sous le nom de Tis7/PC4) code un co‑régulateur transcriptionnel qui module des programmes d’expression génique contrôlant la différenciation cellulaire, la prolifération et les réponses au stress. IFRD1 interagit avec des complexes associés à la chromatine et peut influencer la signalisation inflammatoire, les voies myogéniques et neurodéveloppementales, ainsi que des sorties transcriptionnelles liées à la fonction des cellules immunitaires. Dans des modèles murins, une activité modifiée d’Ifrd1 a été associée à des changements des réponses effectrices des neutrophiles et à des phénotypes de réparation tissulaire, ce qui étaye sa pertinence dans l’étude de l’inflammation et des processus dégénératifs. Comme IFRD1 affecte des réseaux transcriptionnels dépendants du contexte, il est fréquemment étudié dans les mécanismes d’engagement de lignée, de régénération et de biologie de la réponse de l’hôte.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO IFRD1 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Ifrd1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Ifrd1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Ifrd1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine IFRD1.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Ifrd1 pour l'étude de la signalisation de IFRD1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Ifrd1 essentiels à la fonction de IFRD1
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Ifrd1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le IFRD1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le IFRD1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Ifrd1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le IFRD1 plasmide HDR (m) et le IFRD1 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Ifrd1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Ifrd1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.