Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
IFRD1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421053
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- IFRD1 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico IFRD1, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: IFRD1 Anticuerpo (D-7): sc-515012
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
IFRD1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421053 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Ifrd1 (regulador del desarrollo relacionado con el interferón 1; también conocido como Tis7/PC4) codifica un correagulador transcripcional que modula programas de expresión génica que controlan la diferenciación celular, la proliferación y las respuestas al estrés. IFRD1 interactúa con complejos asociados a la cromatina y puede influir en la señalización inflamatoria, en vías miogénicas y del neurodesarrollo, y en salidas transcripcionales vinculadas a la función de células inmunitarias. En modelos murinos, la actividad alterada de Ifrd1 se ha asociado con cambios en las respuestas efectoras de los neutrófilos y en fenotipos de reparación tisular, lo que respalda su relevancia en estudios de inflamación y procesos degenerativos. Dado que IFRD1 afecta redes transcripcionales dependientes del contexto, se investiga con frecuencia en mecanismos de compromiso de linaje, regeneración y biología de la respuesta del hospedador.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO IFRD1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Ifrd1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Ifrd1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Ifrd1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína IFRD1.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Ifrd1 para la investigación de la señalización de IFRD1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Ifrd1 críticos para la función de IFRD1
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Ifrd1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido IFRD1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido IFRD1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Ifrd1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR IFRD1 (m) y el plásmido HDR IFRD1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Ifrd1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Ifrd1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.