Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (m) IFN-γRα: sc-421051-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)IFN-γRα consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa IFN-γRα (m) y el plásmido de doble nickasa IFN-γRα (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Ifngr1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: IFN-γRα Anticuerpo (GIR-94): sc-12755
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) IFN-γRα | sc-421051-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) IFN-γRα | sc-421051-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Ifngr1 codifica la cadena alfa del receptor de interferón gamma del ratón (IFN-γRα), la subunidad de unión al ligando necesaria para que las células respondan a IFN-γ. Tras la unión del receptor, IFN-γRα coopera con IFNGR2 para activar JAK1/JAK2 y la señalización downstream de STAT1, impulsando programas transcripcionales que regulan la presentación de antígenos, la activación de macrófagos y las funciones efectoras antimicrobianas. Este eje configura la inmunidad de tipo Th1 y el diálogo inflamatorio, influyendo en las respuestas de la barrera epitelial y el reclutamiento de leucocitos. La desregulación de la señalización IFN-γ–JAK/STAT se ha relacionado con inmunopatología y con fenotipos alterados de defensa del huésped, lo que convierte a Ifngr1 en un locus útil para estudios mecanísticos en modelos de enfermedad inmunitaria e inflamatoria.
IFN-γRα El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Ifngr1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Ifngr1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Ifngr1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Ifngr1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.