Plasmide Double Nickase (m) IFI-44: sc-430287-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) IFI-44 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide IFI-44 Double Nickase (m) et le plasmide IFI-44 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Ifi44. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) IFI-44 | sc-430287-NIC | 20 µg | $410.00 |
La protéine 44 induite par l’interféron (IFI-44), codée par le gène murin *Ifi44*, est un produit de gène stimulé par l’interféron, induit en aval de la signalisation de l’interféron de type I et de l’activation des récepteurs de reconnaissance des motifs (pattern-recognition receptors) lors des réponses antivirales et inflammatoires. L’expression d’IFI-44 est couramment utilisée comme indicateur de l’activation de l’immunité innée et est associée à la régulation de programmes cellulaires tels que les réseaux transcriptionnels pilotés par l’interféron et les mécanismes de restriction de l’hôte. Une dérégulation d’IFI-44 et de signatures apparentées de gènes stimulés par l’interféron est observée dans des contextes infectieux et immunomédiés, ce qui étaye son utilité pour étudier la biologie des voies de l’interféron, les états d’activation des cellules immunitaires et les phénotypes moléculaires associés à l’inflammation. Dans les systèmes de modèles murins, la perturbation de *Ifi44* aide à disséquer les mécanismes de réponse à l’interféron et les fonctions effectrices en aval dans différents tissus.
IFI-44 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Ifi44 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Ifi44. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Ifi44. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Ifi44.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.