Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
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IFI-202 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-424028
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- IFI-202 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico IFI-202, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: IFI-202 Antibody (F-7): sc-166253
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
IFI-202 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m) | sc-424028 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
Il gene murino **Ifi202b** codifica **IFI-202**, un membro inducibile dagli interferoni della famiglia p200 (PYHIN), implicato nella regolazione dell’immunità innata e nel controllo delle decisioni sul destino cellulare. IFI-202 è stato associato alla modulazione delle risposte al danno del DNA, della progressione del ciclo cellulare e della segnalazione apoptotica, con connessioni funzionali alle reti interferone/ISG che modellano l’espressione genica infiammatoria. Nelle cellule immunitarie e in contesti stimolati da interferone, un’attività alterata di Ifi202b è associata a una disregolazione dell’omeostasi immunitaria ed è stata studiata in relazione a fenotipi simil-autoimmuni e a meccanismi di malattia infiammatoria in modelli murini.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO IFI-202 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Ifi202b in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Ifi202b insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Ifi202b a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina IFI-202.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Ifi202b per lo studio della segnalazione di IFI-202, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni Ifi202b critici per la funzione di IFI-202
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Ifi202b per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal IFI-202 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal IFI-202 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Ifi202b. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal IFI-202 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR IFI-202 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Ifi202b per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Ifi202b definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.