I-FABP Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-416794-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- I-FABPO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase I-FABP (h) e o Plasmídeo Double Nickase I-FABP (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para FABP2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:I-FABP Anticorpo (E-9): sc-374482
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
I-FABP Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-416794-NIC | 20 µg | $410.00 |
A proteína de ligação a ácidos graxos 2 (FABP2) codifica a proteína intestinal de ligação a ácidos graxos (I-FABP), uma chaperona lipídica citosólica altamente enriquecida nos enterócitos do intestino delgado. A I-FABP liga-se a ácidos graxos de cadeia longa e a outros ligantes hidrofóbicos para facilitar o tráfego intracelular em direção à β-oxidação, à síntese de triglicerídeos e à remodelação de membranas, conectando-a a vias que coordenam a absorção de nutrientes e a homeostase lipídica. Por seu papel no processamento de lipídios da dieta e na manutenção do equilíbrio metabólico do epitélio, a FABP2 é frequentemente estudada no contexto da fisiologia da barreira intestinal, do estresse epitelial relacionado à inflamação e da desregulação lipídica associada a doenças metabólicas. Alterações na atividade ou na expressão de FABP2 têm sido usadas como um indicador molecular de lesão de enterócitos e de permeabilidade intestinal perturbada em sistemas experimentais.
I-FABP O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus FABP2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de FABP2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função FABP2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com FABP2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.