Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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HSP90B1/HSP90 beta Plasmide Double Nickase (m): sc-420980-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- HSP90B1/HSP90 beta Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il HSP90B1/HSP90 beta Double Nickase Plasmid (m) e il HSP90B1/HSP90 beta Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Hsp90ab1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
HSP90B1/HSP90 beta Plasmide Double Nickase (m) | sc-420980-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HSP90B1/HSP90 beta Plasmide Double Nickase (m2) | sc-420980-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Hsp90ab1 codifica lo chaperone molecolare citosolico HSP90 beta, che sostiene la proteostasi promuovendo il ripiegamento, la stabilizzazione e la maturazione conformazionale di un ampio repertorio di proteine client, tra cui chinasi proteiche, recettori degli ormoni steroidei e adattatori di segnalazione. Attraverso cicli di chaperonaggio dipendenti dall’ATP insieme a co-chaperoni, contribuisce alle risposte allo stress, al controllo qualità delle proteine e all’assemblaggio di complessi multiproteici, interfacciandosi con vie quali MAPK/ERK, PI3K–AKT e la segnalazione dell’immunità innata. L’attività di HSP90 beta nel topo è inoltre collegata a processi di omeostasi cellulare, inclusi l’autofagia e il turnover proteasomiale, che modulano le risposte allo shock termico e allo stress ossidativo. Una capacità di chaperonaggio deregolata è spesso studiata nel contesto della dipendenza dalla segnalazione oncogenica, del misfolding proteico nelle malattie neurodegenerative e dei meccanismi delle patologie infiammatorie, rendendo Hsp90ab1 un nodo utile per la dissezione delle vie di segnalazione.
HSP90B1/HSP90 beta Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Hsp90ab1 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Hsp90ab1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Hsp90ab1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Hsp90ab1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.