Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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HPS-6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407496
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HPS-6 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico HPS-6, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HPS-6 Anticorpo (C-12): sc-373786
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HPS-6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-407496 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
HPS6 codifica a HPS-6, um componente central do complexo 2 de biogênese de organelos relacionados a lisossomos (BLOC-2), que regula a triagem de cargas e o tráfego vesicular para organelos especializados, como melanossomas e grânulos densos plaquetários. Por meio do seu papel no transporte endossomal e na maturação de organelos, a HPS-6 influencia a localização de proteínas, a dinâmica de membranas e vias de tráfego intracelular que se cruzam com a função lisossomal. A disfunção de HPS6 está associada à síndrome de Hermansky–Pudlak tipo 6, uma doença caracterizada por defeitos em organelos relacionados a lisossomos e por fenótipos celulares ligados a alterações de pigmentação e da hemostasia. Modelos de perda de função de HPS6 são usados para investigar mecanismos de biogênese de organelos, entrega de cargas e programas de tráfego específicos de tipos celulares em sistemas celulares humanos relevantes.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO HPS-6 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene HPS6 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do HPS6, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do HPS6 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína HPS-6.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de HPS6 para a investigação da sinalização de HPS-6, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) HPS6 críticos para a função HPS-6
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos HPS6 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo HPS-6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo HPS-6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus HPS6. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo HPS-6 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR HPS-6 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia HPS6 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo HPS6 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.