Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) HPK1: sc-402367-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) HPK1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide HPK1 Double Nickase (h) et le plasmide HPK1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant MAP4K1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: HPK1 Antibody (G-9): sc-374183
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) HPK1 | sc-402367-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) HPK1 | sc-402367-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MAP4K1 code la kinase 1 des progéniteurs hématopoïétiques (HPK1), une sérine/thréonine kinase de la famille Ste20 qui agit comme régulateur en amont de la signalisation MAPK dans les cellules immunitaires. HPK1 relaie les signaux en aval des récepteurs antigéniques et des voies de costimulation, en modulant les seuils d’activation via l’ajustement des cascades ERK/JNK, de nœuds de signalisation liés à NF-κB et du remodelage du cytosquelette. En affinant des interactions dépendantes de la phosphorylation entre adaptateurs et réseaux d’ubiquitination, HPK1 influence l’intensité de la signalisation du récepteur des cellules T, les programmes de production de cytokines et la dynamique de la synapse immunologique. Une activité altérée de MAP4K1/HPK1 a été associée à des états de signalisation immunitaire dérégulés et fait l’objet d’études fréquentes en immuno-oncologie et dans des voies moléculaires centrées sur l’inflammation.
HPK1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus MAP4K1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de MAP4K1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de MAP4K1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de MAP4K1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.