Plasmide Double Nickase (h) HoxD13: sc-404471-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) HoxD13 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide HoxD13 Double Nickase (h) et le plasmide HoxD13 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant HOXD13. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) HoxD13 | sc-404471-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) HoxD13 | sc-404471-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HOXD13 code pour HoxD13, un facteur de transcription à homéoboîte qui contrôle l’identité positionnelle et la mise en place des structures au cours du développement embryonnaire, avec un rôle majeur dans la morphogenèse des membres et des appendices distaux. HoxD13 se fixe à l’ADN via son domaine homéotique conservé (homeodomaine) afin de coordonner des réseaux de régulation génique qui gouvernent la segmentation, la chondrogenèse et les programmes de différenciation, en s’intégrant à la régulation plus large du cluster HOX ainsi qu’à des signaux morphogéniques tels que SHH et WNT lors de l’organisation des tissus. La perturbation ou la dérégulation de HOXD13 modifie les programmes transcriptionnels du développement et a été associée à des malformations congénitales des membres, notamment la synpolydactylie, ce qui en fait une cible de choix pour étudier les relations génotype‑phénotype en biologie du développement humain.
HoxD13 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus HOXD13 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de HOXD13. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de HOXD13. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de HOXD13.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.