HoxA10 Plasmide Double Nickase (h): sc-401463-NIC

HOXA10 codifica il fattore di trascrizione homeobox HoxA10, un regolatore di legame al DNA specifico di sequenza che coordina il patterning embrionale e l’omeostasi dei tessuti adulti attraverso il controllo di reti geniche che determinano il destino di linea. In contesti ematopoietici e mesenchimali, HoxA10 integra programmi di segnalazione dello sviluppo per modulare proliferazione, differenziamento, adesione e rimodellamento della matrice extracellulare, con effetti a valle sui percorsi di regolazione del ciclo cellulare e della trascrizione. Un’espressione disregolata di HOXA10 o un’alterazione dei suoi circuiti regolatori è stata associata a una maturazione mieloide compromessa e a un più ampio riprogrammamento trascrizionale osservato in stati associati a neoplasie, rendendolo un nodo utile per studiare il controllo dei geni dello sviluppo in modelli rilevanti per la malattia. In biologia riproduttiva, HOXA10 contribuisce ai programmi di differenziamento endometriale e di recettività uterina, supportando studi sulle reti trascrizionali responsivi agli ormoni.

HoxA10 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus HOXA10 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di HOXA10. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di HOXA10. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con HOXA10 interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.