HoxA10 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-420900

Übersicht

Hoxa10 kodiert den Homeobox-Transkriptionsfaktor HoxA10, einen DNA-bindenden Regulator, der die embryonale anterior–posteriore Achse strukturiert und die regionale Identität in den sich entwickelnden Urogenital- und Reproduktionstrakten festlegt. In der Maus trägt HoxA10 zu entwicklungsbezogenen genregulatorischen Netzwerken bei, indem es Transkriptionsprogramme koordiniert, die Zellschicksalsfestlegung, Differenzierung und Morphogenese steuern, mit kontextabhängigen Effekten auf Proliferation und Gewebeumbau. Seine Aktivität ist in breitere HOX/TALE-Kofaktor-Netzwerke und die Chromatinregulation eingebunden, um segmentspezifische transkriptionelle Zustände zu etablieren. Eine fehlregulierte HOXA10-Expression wurde mit veränderter hämatopoetischer Differenzierung und leukämogenen Transkriptionsprogrammen in Verbindung gebracht, was seine Nutzung als mechanistischen Knotenpunkt in Modellen von Entwicklungsstörungen und der krebsrelevanten Linienspezifikation unterstützt.

Das HoxA10 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Hoxa10-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Hoxa10-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Hoxa10 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die HoxA10-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Hoxa10-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der HoxA10-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Hoxa10-Exone abzielen, die für die HoxA10-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Hoxa10-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom HoxA10 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom HoxA10 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Hoxa10-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das HoxA10 HDR-Plasmid (m) und HoxA10 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Hoxa10-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Hoxa10-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.