HMX2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420886

Descripción general

Hmx2 codifica el factor de transcripción homeobox HMX2, una proteína nuclear de unión al ADN que regula programas de expresión génica durante el desarrollo embrionario. En el ratón, HMX2 participa en el patrón y la diferenciación de estructuras sensoriales, con funciones destacadas en la morfogénesis del oído interno y la formación del sistema vestibular mediante el control transcripcional de la especificación de linaje. Al coordinar redes transcripcionales del desarrollo, HMX2 influye en las decisiones de destino celular, la arquitectura tisular y la maduración de epitelios especializados. La alteración de vías relacionadas con Hmx2 es relevante para el estudio de defectos congénitos que afectan la audición y el equilibrio, así como de mecanismos más amplios de desregulación del desarrollo.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO HMX2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Hmx2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Hmx2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Hmx2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína HMX2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Hmx2 para la investigación de la señalización de HMX2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Hmx2 críticos para la función de HMX2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Hmx2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido HMX2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido HMX2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Hmx2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR HMX2 (m) y el plásmido HDR HMX2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Hmx2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Hmx2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.