Plasmide CRISPR/Cas9 KO HMG-20A (h): sc-407302
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- HMG-20A Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique HMG-20A, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: HMG-20A Antibody (D-5): sc-393028
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO HMG-20A (h) | sc-407302 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
HMG20A code HMG-20A, un facteur associé à la chromatine de type « high mobility group » qui contribue à la régulation transcriptionnelle en influençant l’organisation des nucléosomes et l’accès des complexes régulateurs à l’ADN. Il a été impliqué dans le contrôle épigénétique des programmes de lignée, notamment l’expression de gènes du neurodéveloppement, via des interactions avec des machineries de remodelage de la chromatine et de modification des histones. En modulant l’activité des promoteurs et des enhancers, HMG-20A peut affecter le contrôle du cycle cellulaire, la différenciation et le maintien de l’identité cellulaire. Une régulation altérée des états de chromatine liés à HMG20A est pertinente pour l’étude de phénotypes neurologiques et de la dérégulation transcriptionnelle associée au cancer.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO HMG-20A (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène HMG20A dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du HMG20A, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert HMG20A à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine HMG-20A.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en HMG20A pour l'étude de la signalisation de HMG-20A, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de HMG20A essentiels à la fonction de HMG-20A
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de HMG20A pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le HMG-20A plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le HMG-20A plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus HMG20A. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le HMG-20A plasmide HDR (h) et le HMG-20A (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie HMG20A pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles HMG20A définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.