HIPK3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406669

Descripción general

La proteína quinasa 3 que interactúa con el homeodominio (HIPK3) es una quinasa de serina/treonina que integra señales de estrés y del desarrollo mediante la fosforilación de reguladores transcripcionales, moldeando así programas de expresión génica vinculados a decisiones sobre el destino celular. Se ha implicado a HIPK3 en la modulación de la señalización apoptótica, las respuestas al daño del ADN y las salidas transcripcionales asociadas a TGF-β/BMP mediante interacciones con proteínas homeobox y otros factores nucleares. A través de estas funciones, HIPK3 puede influir en la proliferación, la diferenciación y la tolerancia al estrés celular, procesos que con frecuencia se ven alterados en la biología del cáncer y en contextos de remodelación tisular. La actividad o expresión desregulada de HIPK3 también se ha asociado con cambios en la señalización inflamatoria y la homeostasis metabólica, lo que respalda su utilidad como nodo mecanístico en estudios centrados en vías de señalización.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO HIPK3 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen HIPK3 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del HIPK3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de HIPK3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína HIPK3.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en HIPK3 para la investigación de la señalización de HIPK3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de HIPK3 críticos para la función de HIPK3
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de HIPK3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido HIPK3 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido HIPK3 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus HIPK3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR HIPK3 (h) y el plásmido HDR HIPK3 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología HIPK3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana HIPK3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.