Herc5 Plasmide Double Nickase (h): sc-404993-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Herc5 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Herc5 Double Nickase Plasmid (h) e il Herc5 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira HERC5. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Herc5 Plasmide Double Nickase (h) | sc-404993-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Herc5 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404993-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HERC5 codifica una ligasi E3 inducibile dall’interferone che funge da principale E3 per la coniugazione di ISG15 (ISGilazione), modificando le proteine di nuova sintesi e modulando le difese antivirali innate. HERC5 si localizza ai ribosomi e coordina l’azione con gli enzimi E1 (UBE1L) ed E2 (UBE2L6) per regolare la stabilità proteica, il traffico intracellulare e gli output della segnalazione immunitaria in risposta all’interferone di tipo I. Attraverso il controllo della dinamica dell’ISGilazione, HERC5 influenza vie associate alla restrizione dei patogeni, alle risposte allo stress e alla proteostasi; la sua disregolazione viene studiata in contesti di segnalazione interferonica alterata e stati infiammatori. Questo gene è spesso analizzato come nodo di collegamento tra le modifiche di tipo ubiquitina e le interazioni ospite–virus, nonché i fenotipi cellulari mediati dal sistema immunitario.
Herc5 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus HERC5 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di HERC5. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di HERC5. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con HERC5 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.