Heme Oxygenase 1/HMOX1 Plasmide Double Nickase (m): sc-420882-NIC

Il gene murino **Hmox1** codifica l’eme ossigenasi 1 (HMOX1), un enzima inducibile e sensibile allo stress che catalizza la degradazione dell’eme in biliverdina, monossido di carbonio e ferro ferroso, collegando così il turnover dell’eme all’omeostasi redox. HMOX1 è regolata da vie di stress ossidativo ed elettrofilo, in particolare tramite la segnalazione NRF2–KEAP1, e si integra con le risposte infiammatorie e allo stress mitocondriale. Modulando le specie reattive dell’ossigeno, la gestione del ferro e programmi trascrizionali citoprotettivi, HMOX1 influenza la polarizzazione dei macrofagi, la funzione endoteliale e l’adattamento dei tessuti al danno. Un’attività di HMOX1 deregolata è stata associata a modelli di infiammazione, ischemia-riperfusione, disfunzione metabolica, neurodegenerazione e biologia del cancro, rendendola un bersaglio utile per studi meccanicistici.

Heme Oxygenase 1/HMOX1 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Hmox1 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Hmox1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Hmox1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Hmox1 interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.