Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
HAS2 Plasmide Double Nickase (h): sc-401032-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- HAS2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il HAS2 Double Nickase Plasmid (h) e il HAS2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira HAS2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: HAS2 Antibody (A-7): sc-514737
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
HAS2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-401032-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HAS2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-401032-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene umano **HAS2** codifica la ialuronano sintasi 2, un enzima associato alla membrana che polimerizza UDP-acido glucuronico e UDP-N-acetilglucosamina per produrre ialuronano ad alto peso molecolare sulla membrana plasmatica. La deposizione di ialuronano guidata da HAS2 modella la matrice extracellulare e il rivestimento pericellulare, influenzando idratazione, adesione e migrazione cellulare attraverso interazioni con recettori quali CD44 e RHAMM. La sua attività è integrata con vie che controllano il rimodellamento tissutale e la segnalazione infiammatoria, ed è regolata da segnali di fattori di crescita e dallo stato metabolico cellulare. Un’espressione deregolata di HAS2 o l’accumulo di ialuronano sono frequentemente studiati in contesti di fibrosi, infiammazione cronica e biologia del microambiente tumorale.
HAS2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus HAS2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di HAS2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di HAS2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con HAS2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.