group IID sPLA2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422283
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- group IID sPLA2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico group IID sPLA2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
group IID sPLA2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422283 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Pla2g2d codifica a fosfolipase A2 secretada do grupo IID (sPLA2), uma enzima extracelular que hidrolisa fosfolipídios de membrana para liberar ácidos graxos livres e lisofosfolipídios, moldando os estoques de mediadores lipídicos que alimentam vias de sinalização de eicosanoides e relacionadas. Em tecidos de camundongo enriquecidos em atividade imune, a sPLA2 do grupo IID contribui para a regulação do tônus inflamatório ao modular a função de células apresentadoras de antígeno, programas de citocinas e redes lipídicas associadas à resolução. Por meio de efeitos sobre a disponibilidade de ácido araquidônico e a biossíntese subsequente de prostaglandinas/leucotrienos, Pla2g2d conecta o remodelamento de fosfolipídios ao diálogo entre a imunidade inata e adaptativa. A expressão ou atividade desregulada tem sido associada a suscetibilidade alterada a patologias inflamatórias e a remodelamento tecidual dirigido pelo sistema imune em modelos pré-clínicos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO group IID sPLA2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Pla2g2d em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Pla2g2d, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Pla2g2d na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína group IID sPLA2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Pla2g2d para a investigação da sinalização de group IID sPLA2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Pla2g2d críticos para a função group IID sPLA2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Pla2g2d para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo group IID sPLA2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo group IID sPLA2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Pla2g2d. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo group IID sPLA2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR group IID sPLA2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Pla2g2d para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Pla2g2d definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.