GPSM3 Lentiviral Activation Particles (m): sc-430655-LAC

Das Mausgen *Gpsm3* kodiert GPSM3, einen GoLoco-Motiv-haltigen Regulator der Signalübertragung heterotrimerer G-Proteine, der an GDP-beladene Gα‑Untereinheiten bindet und die rezeptorgetriebene Signalausbreitung moduliert. Durch die Feinabstimmung Gαi‑abhängiger Signalwege beeinflusst GPSM3 die Dynamik nachgeschalteter Second Messenger und integriert Signale aus Chemokin- und anderen GPCR-Netzwerken, die die Migration und Aktivierung von Leukozyten steuern. Die Expression von GPSM3 ist in Immunzelllinien angereichert, was eine Verbindung zu inflammatorischen Signalprogrammen und zur Homöostase des angeborenen Immunsystems nahelegt. Eine fehlregulierte GPSM3-assoziierte Signalgebung wurde im Kontext immunvermittelter Krankheitsmechanismen untersucht, wodurch GPSM3 ein nützliches Ziel zur Analyse der GPCR–G‑Protein-Schaltkreise in Mausmodellen darstellt.

GPSM3 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Gpsm3-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

GPSM3 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Gpsm3-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen GPSM3-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Gpsm3-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.