Plásmido Doble Nickase (h) GPR50: sc-402934-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)GPR50 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa GPR50 (h) y el plásmido de doble nickasa GPR50 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a GPR50. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) GPR50 | sc-402934-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) GPR50 | sc-402934-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GPR50 codifica un receptor huérfano acoplado a proteína G (GPCR) que está estructuralmente relacionado con los receptores de melatonina, pero se considera no canónico en cuanto a señalización, con funciones destacadas en la regulación neuroendocrina y en la biología asociada a los ritmos circadianos. Puede influir en la capacidad de respuesta celular a las vías de la melatonina mediante interacciones entre receptores y la modulación del tráfico de GPCR y de su competencia de señalización, afectando procesos posteriores ligados al AMPc y programas transcripcionales. Los patrones de expresión y la variación genética de GPR50 se han asociado con fenotipos metabólicos y rasgos neuropsiquiátricos, lo que respalda su relevancia en estudios del equilibrio energético, la regulación del estado de ánimo y la función hipotalámica. Como receptor de membrana con expresión sesgada por tejido, GPR50 también es útil para analizar la comunicación cruzada en redes de GPCR y las salidas de señalización dependientes del contexto en modelos celulares humanos.
GPR50 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus GPR50 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de GPR50. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de GPR50. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con GPR50 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.