GPR171 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-412047

Descripción general

GPR171 codifica un receptor acoplado a proteína G de clase A (tipo rodopsina) huérfano, predominantemente acoplado a señalización inhibitoria, y se ha implicado en la modulación del AMPc intracelular y de programas transcripcionales aguas abajo. Se expresa en contextos inmunitarios y asociados al sistema nervioso, donde se ha vinculado con la regulación del tono de la señalización celular, circuitos neuromoduladores y la capacidad de respuesta inflamatoria. Las interacciones descritas con el neuropéptido BigLEN sugieren un papel en la señalización de GPCR mediada por péptidos y en el control a nivel de red de los estados de activación celular. La señalización alterada de GPCR que involucra a GPR171 se ha explorado en relación con fenotipos neuroconductuales y la regulación inmunitaria, lo que respalda su relevancia para estudios a nivel de vías sobre la transducción de señales mediada por receptores.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO GPR171 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen GPR171 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del GPR171 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de GPR171 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína GPR171.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en GPR171 para la investigación de la señalización de GPR171, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de GPR171 críticos para la función de GPR171
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de GPR171 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido GPR171 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido GPR171 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus GPR171. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR GPR171 (h) y el plásmido HDR GPR171 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología GPR171 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana GPR171 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.