GPIHBP1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403473

Descripción general

GPIHBP1 (proteína 1 de unión a lipoproteínas de alta densidad anclada a glicosilfosfatidilinositol) es una proteína de superficie de las células endoteliales que captura la lipoproteína lipasa (LPL) y facilita su transporte hacia la luz capilar, permitiendo la hidrólisis intravascular de lipoproteínas ricas en triglicéridos. Al organizar el eje de procesamiento de la LPL en el endotelio, GPIHBP1 es fundamental para las vías de captación y depuración de lípidos que regulan la homeostasis de los triglicéridos plasmáticos. La alteración de la función de GPIHBP1 se asocia con hipertrigliceridemia grave y un procesamiento deficiente de quilomicrones/VLDL, lo que vincula a este gen con fenotipos metabólicos relacionados con la dislipidemia. Por ello, GPIHBP1 se estudia ampliamente en biología vascular, metabolismo de lipoproteínas y mecanismos que gobiernan el manejo endotelial de la carga lipídica.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO GPIHBP1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen GPIHBP1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del GPIHBP1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de GPIHBP1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína GPIHBP1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en GPIHBP1 para la investigación de la señalización de GPIHBP1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de GPIHBP1 críticos para la función de GPIHBP1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de GPIHBP1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido GPIHBP1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido GPIHBP1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus GPIHBP1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR GPIHBP1 (h) y el plásmido HDR GPIHBP1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología GPIHBP1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana GPIHBP1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.