Glut9 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406232

Übersicht

SLC2A9 kodiert Glut9, einen erleichterten Transporter, der eine zentrale Rolle im zellulären Urat-Handling und im Hexosetransport spielt und insbesondere in der Nieren- und Leberphysiologie bedeutsam ist. Glut9 trägt zur transmembranen Bewegung von Harnsäure und verwandten Metaboliten bei und beeinflusst dadurch die systemische Urathomöostase sowie das Redoxgleichgewicht. Eine veränderte SLC2A9-Aktivität ist mit Unterschieden in den Serumuratspiegeln verknüpft und wurde mit Störungen des Purinstoffwechsels in Verbindung gebracht, darunter Hyperurikämie und eine erhöhte Gichtanfälligkeit, sowie mit nierenbezogenen Phänotypen. In Zellmodellen kann eine Störung von SLC2A9 den metabolischen Fluss, oxidativen Stressantworten und Transporternetzwerke beeinflussen, die für den epithelialen Transport und Nährstoffsensorik-Signalwege relevant sind.

Das Glut9 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des SLC2A9-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des SLC2A9-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von SLC2A9 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Glut9-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von SLC2A9-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Glut9-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf SLC2A9-Exone abzielen, die für die Glut9-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere SLC2A9-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Glut9 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom Glut9 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des SLC2A9-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Glut9 HDR-Plasmid (h) und Glut9 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von SLC2A9-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten SLC2A9-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.