Ggnbp2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-432161

Descripción general

Ggnbp2 (proteína 2 de unión a gametogenetina) es una proteína asociada a células germinales implicada en la biología reproductiva masculina, con enriquecimiento descrito en tejidos testiculares y vínculos con procesos relacionados con la espermatogénesis. Aunque sus socios moleculares aún no están completamente definidos, Ggnbp2 se ha asociado con la regulación de programas transcripcionales y de estados de diferenciación celular en la línea germinal. La alteración de genes activos en este contexto puede influir en la organización de la cromatina, la progresión meiótica y el desarrollo del esperma, lo que hace que Ggnbp2 sea de interés para estudiar las vías que sustentan la fertilidad y la homeostasis de las células germinales. Los patrones de expresión alterados de reguladores enriquecidos en testículo como Ggnbp2 también se analizan en el contexto de un control aberrante del ciclo celular y una diferenciación desregulada en modelos relevantes para enfermedad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Ggnbp2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Ggnbp2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Ggnbp2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Ggnbp2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Ggnbp2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Ggnbp2 para la investigación de la señalización de Ggnbp2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Ggnbp2 críticos para la función de Ggnbp2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Ggnbp2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Ggnbp2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Ggnbp2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Ggnbp2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Ggnbp2 (m) y el plásmido HDR Ggnbp2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Ggnbp2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Ggnbp2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.