Plasmide Double Nickase (h) GCN1L1: sc-411545-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) GCN1L1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide GCN1L1 Double Nickase (h) et le plasmide GCN1L1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant GCN1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) GCN1L1 | sc-411545-NIC | 20 µg | $410.00 |
GCN1 code pour GCN1L1, un cofacteur conservé qui couple les ribosomes en cours de traduction à la réponse intégrée au stress (ISR) en favorisant l’activation de la kinase eIF2α GCN2 en situation de limitation en acides aminés et lors de stress apparentés. Via ce mécanisme de détection associé au ribosome, GCN1L1 influence la reprogrammation traductionnelle, les sorties transcriptionnelles dépendantes d’ATF4 et des voies plus larges de protéostasie, à l’interface avec la signalisation nutritionnelle et l’adaptation cellulaire. La dysrégulation des composants de l’ISR, y compris l’axe GCN1–GCN2, a été associée dans la littérature à des altérations de l’homéostasie métabolique, à des aspects de la neurobiologie et à des phénotypes cellulaires liés au stress pertinents pour la modélisation de maladies. En conséquence, GCN1L1 est fréquemment étudié dans des contextes tels que les réponses à la privation de nutriments, le stress protéotoxique et le contrôle de la traduction.
GCN1L1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus GCN1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de GCN1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de GCN1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de GCN1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.