Plásmido Doble Nickase (h) GALK2: sc-410788-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)GALK2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa GALK2 (h) y el plásmido de doble nickasa GALK2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a GALK2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) GALK2 | sc-410788-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) GALK2 | sc-410788-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GALK2 codifica la galactoquinasa 2, una quinasa citosólica de carbohidratos implicada en el metabolismo de la galactosa y, de forma más amplia, de las hexosas, mediante la fosforilación de la galactosa a galactosa-1-fosfato. Al influir en el flujo a través de la red relacionada con la vía de Leloir y en las reservas posteriores de azúcares nucleotídicos, GALK2 puede afectar la capacidad de glicosilación y el equilibrio energético celular. La alteración en el manejo de intermediarios de la galactosa y las respuestas asociadas al estrés metabólico es relevante para estudios de errores innatos del metabolismo y de fenotipos similares a hepatocitos en sistemas modelo. Por ello, GALK2 se investiga con frecuencia en el contexto de la regulación de vías metabólicas, la utilización de carbono y la adaptación metabólica ante perturbaciones nutricionales.
GALK2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus GALK2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de GALK2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de GALK2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con GALK2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.