Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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galectin-8 Double Nickase Plasmid (h): sc-401785-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das galectin-8 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- galectin-8 Double-Nickase-Plasmid (h) und galectin-8 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf LGALS8 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: galectin-8: sc-377133
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
galectin-8 Double Nickase Plasmid (h) | sc-401785-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
galectin-8 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-401785-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LGALS8 kodiert Galectin-8, ein Tandem-Repeat-β-Galaktosid-bindendes Lektin, das als glykanabhängiger Sensor für Membranschäden und als Modulator von Zell‑Zell‑ und Zell‑Matrix‑Interaktionen fungiert. Galectin-8 ist an der selektiven Autophagie beteiligt, indem es freigelegte Glykane auf rupturierten Endomembranen erkennt und nachgeschaltete Effektoren rekrutiert, die die Xenophagie und die Beseitigung beschädigter Vesikel fördern. Zudem beeinflusst es Integrin-Signalwege, Zelladhäsion und intrazellulären Transport und verknüpft so die Erkennung extrazellulärer Glykoproteine mit intrazellulären Stressantwort-Signalwegen. Eine fehlregulierte LGALS8-Expression und lektinvermittelte Signalübertragung wurden mit entzündlichen Prozessen, Pathogen‑Wirt‑Interaktionen und krebsassoziierten Phänotypen wie veränderter Adhäsion und Invasion in Verbindung gebracht, was mechanistische Studien in immunologischen und epithelialen Kontexten unterstützt.
galectin-8 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des LGALS8-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von LGALS8 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die LGALS8-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit LGALS8-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.