Plásmido Doble Nickase (h) GABAA Rβ1: sc-403935-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)GABAA Rβ1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa GABAA Rβ1 (h) y el plásmido de doble nickasa GABAA Rβ1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a GABRB1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) GABAA Rβ1 | sc-403935-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) GABAA Rβ1 | sc-403935-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GABRB1 codifica la subunidad β1 del receptor humano GABA\(_A\), un canal de cloruro pentamérico activado por ligando que media la neurotransmisión inhibitoria rápida en el sistema nervioso central. La incorporación de subunidades β es fundamental para el ensamblaje del receptor, su tráfico y su localización sináptica, modulando la conductancia de cloruro y la excitabilidad neuronal. La señalización del receptor GABA\(_A\) se interrelaciona con la plasticidad dependiente de la actividad, las oscilaciones de red y el control homeostático del equilibrio entre excitación e inhibición. La alteración de la expresión de GABRB1 o de la composición del receptor se ha vinculado, en estudios genéticos y funcionales, con fenotipos del neurodesarrollo y neuropsiquiátricos, lo que respalda su relevancia en los mecanismos subyacentes a la epilepsia, la discapacidad intelectual y trastornos relacionados.
GABAA Rβ1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus GABRB1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de GABRB1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de GABRB1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con GABRB1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.