Plásmido Doble Nickase (h) FUNDC1: sc-403031-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)FUNDC1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa FUNDC1 (h) y el plásmido de doble nickasa FUNDC1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a FUNDC1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) FUNDC1 | sc-403031-NIC | 20 µg | $410.00 |
FUNDC1 codifica un receptor de la membrana externa mitocondrial que promueve la mitofagia inducida por hipoxia y por estrés al unirse a LC3 mediante su motivo LIR y coordinar la eliminación de mitocondrias dañadas. Su actividad está regulada por un control dependiente de la fosforilación de su afinidad por LC3 e interactúa con la dinámica mitocondrial, la homeostasis bioenergética y la señalización de especies reactivas de oxígeno. A través de estos procesos, FUNDC1 influye en programas de supervivencia celular vinculados a respuestas al estrés isquémico, a defectos en el control de calidad mitocondrial asociados a la neurodegeneración y a la desregulación metabólica. La función alterada de FUNDC1 se ha estudiado en contextos en los que una mitofagia perturbada contribuye a la inflamación y al daño tisular, lo que la convierte en un nodo útil para explorar vías de estrés mitocondrial.
FUNDC1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus FUNDC1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de FUNDC1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de FUNDC1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con FUNDC1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.