Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO FRRS1L (h): sc-407611
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- FRRS1L Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique FRRS1L, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: FRRS1L Antibody (H-8): sc-398692
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO FRRS1L (h) | sc-407611 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
FRRS1L (ferric chelate reductase 1 like) code une protéine associée au réticulum endoplasmique, impliquée dans la biogenèse et la régulation fonctionnelle des récepteurs du glutamate de type AMPA, influençant la transmission synaptique excitatrice et l’activité des réseaux neuronaux. FRRS1L participe à des processus qui gouvernent l’assemblage des récepteurs, leur trafic intracellulaire et leur expression à la surface cellulaire, impactant ainsi des voies de signalisation liées à la plasticité synaptique. L’altération de la fonction de FRRS1L a été associée à des phénotypes neurodéveloppementaux et épileptiques, ce qui en fait une cible pertinente pour l’étude des mécanismes de synaptopathie et des dysfonctionnements neuronaux dépendants de l’activité. Son enrichissement neuronal et son rôle dans la signalisation glutamatergique soutiennent son utilisation pour modéliser, à l’échelle des circuits, les conséquences d’une homéostasie des récepteurs perturbée.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO FRRS1L (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène FRRS1L dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du FRRS1L, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert FRRS1L à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine FRRS1L.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en FRRS1L pour l'étude de la signalisation de FRRS1L, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de FRRS1L essentiels à la fonction de FRRS1L
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de FRRS1L pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le FRRS1L plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le FRRS1L plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus FRRS1L. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le FRRS1L plasmide HDR (h) et le FRRS1L (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie FRRS1L pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles FRRS1L définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.