Plasmide Double Nickase (h) FRP-1: sc-402086-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) FRP-1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide FRP-1 Double Nickase (h) et le plasmide FRP-1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant SFRP1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) FRP-1 | sc-402086-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) FRP-1 | sc-402086-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SFRP1 code pour la protéine sécrétée « secreted frizzled-related protein 1 » (FRP-1), un modulateur soluble de la signalisation Wnt qui se lie aux ligands Wnt et peut entraver leur interaction avec les récepteurs Frizzled. En façonnant les programmes transcriptionnels dépendants de la β-caténine, FRP-1 influence les décisions de destinée cellulaire, la prolifération, la différenciation et des processus associés à la matrice extracellulaire tout au long du développement et de l’homéostasie tissulaire. Une expression altérée de SFRP1 est fréquemment associée à une activité dérégulée de la voie Wnt et a été rapportée dans des contextes variés, notamment l’oncogenèse, la fibrose et le remodelage inflammatoire. Ces caractéristiques font de SFRP1 une cible utile pour analyser les interactions entre voies de signalisation qui gouvernent les transitions épithélio-mésenchymateuses, les états de type « stem » et la signalisation du microenvironnement.
FRP-1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus SFRP1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de SFRP1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de SFRP1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de SFRP1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.