Plásmido Doble Nickase (h) frizzled-10: sc-406690-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)frizzled-10 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa frizzled-10 (h) y el plásmido de doble nickasa frizzled-10 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a FZD10. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) frizzled-10 | sc-406690-NIC | 20 µg | $410.00 |
FZD10 codifica frizzled-10, un receptor de Wnt de siete dominios transmembrana que se une a ligandos Wnt para regular la transcripción dependiente de β-catenina, así como la señalización Wnt no canónica de polaridad celular planar y la señalización vinculada a Ca2+. A través de estas vías, frizzled-10 influye en programas de especificación del destino celular, proliferación, polaridad y migración que son centrales para el desarrollo embrionario y la homeostasis tisular. La desregulación de la señalización FZD10/Wnt se ha asociado con estados de diferenciación alterados y redes de señalización oncogénica en múltiples contextos tumorales, y también es relevante para estudios de fenotipos tipo célula madre y de dinámicas epitelio-mesenquimales. Como receptor de superficie, frizzled-10 ofrece un nodo abordable para analizar la interacción entre vías (cross-talk) entre Wnt, la señalización por factores de crecimiento y la remodelación del citoesqueleto.
frizzled-10 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus FZD10 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de FZD10. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de FZD10. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con FZD10 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.