Plásmido Doble Nickase (h) FPR: sc-418173-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)FPR consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa FPR (h) y el plásmido de doble nickasa FPR (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a FPR1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) FPR | sc-418173-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) FPR | sc-418173-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El receptor 1 de péptidos formilados (FPR1) codifica FPR, un GPCR acoplado a Gi que detecta péptidos N-formilados y otros ligandos quimiotácticos para guiar la migración de neutrófilos y monocitos. La unión del ligando activa la señalización de PLCβ/flujo de Ca²⁺, PI3K–AKT, MAPK y pequeñas GTPasas, coordinando la remodelación de actina, la degranulación y la producción de especies reactivas de oxígeno dependiente de la NADPH oxidasa durante las respuestas inmunitarias innatas. La actividad de FPR1 modula el tráfico de leucocitos y la liberación de mediadores inflamatorios, lo que la vincula con contextos de inflamación desregulada y lesión tisular. La señalización alterada de FPR1 se ha estudiado en escenarios inflamatorios infecciosos y estériles, y en el microambiente tumoral, donde la quimiotaxis mieloide puede influir en la composición inmunitaria.
FPR El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus FPR1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de FPR1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de FPR1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con FPR1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.