Plásmido Doble Nickase (h) FOXP1: sc-418144-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)FOXP1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa FOXP1 (h) y el plásmido de doble nickasa FOXP1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a FOXP1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: FOXP1 Anticuerpo (A-2): sc-398811
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) FOXP1 | sc-418144-NIC | 20 µg | $410.00 |
FOXP1 codifica un factor de transcripción de la familia forkhead box que regula la especificación de linaje, el control del ciclo celular y los programas de diferenciación mediante la unión al ADN dependiente de secuencia y la represión o activación transcripcional. En los sistemas inmunitario y hematopoyético, FOXP1 influye en la maduración de las células B, la quiescencia de las células T y las redes transcripcionales aguas abajo de la señalización por citocinas y receptores de antígeno, mientras que en el sistema nervioso contribuye al patrón del neurodesarrollo y a la expresión génica sináptica. La actividad de FOXP1 se entrecruza con complejos de remodelación de la cromatina y vías del desarrollo que coordinan la proliferación y las decisiones de destino celular. La desregulación de la expresión de FOXP1 o sus mutaciones se han asociado con fenotipos del neurodesarrollo y con estados transcripcionales alterados observados en múltiples contextos tumorales, lo que respalda su uso como un nodo mecanístico en estudios de circuitos transcripcionales.
FOXP1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus FOXP1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de FOXP1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de FOXP1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con FOXP1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.