FOXL2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403351

Descripción general

FOXL2 es un factor de transcripción de la familia forkhead box que desempeña un papel central en la diferenciación de las células de la granulosa, la foliculogénesis ovárica y el mantenimiento de la identidad ovárica. Al unirse a elementos cis-regulatorios y coordinar programas transcripcionales asociados a la cromatina, FOXL2 integra señales que modelan la esteroidogénesis, el control del ciclo celular y la apoptosis en los tejidos reproductivos. La actividad desregulada de FOXL2 altera redes génicas del desarrollo y se asocia estrechamente con trastornos del desarrollo sexual y con la patobiología ovárica, incluidas alteraciones somáticas recurrentes observadas en tumores de células de la granulosa de tipo adulto. Como regulador nuclear con funciones definitorias del linaje, FOXL2 se estudia ampliamente en vías que gobiernan la endocrinología reproductiva, la regulación transcripcional y la biología tumoral específica de tejido.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO FOXL2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen FOXL2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del FOXL2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de FOXL2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína FOXL2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en FOXL2 para la investigación de la señalización de FOXL2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de FOXL2 críticos para la función de FOXL2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de FOXL2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido FOXL2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido FOXL2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus FOXL2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR FOXL2 (h) y el plásmido HDR FOXL2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología FOXL2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana FOXL2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.