Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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FOP Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407061
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- FOP El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico FOP, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: FOP Anticuerpo (B-1): sc-374340
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
FOP Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-407061 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
FGFR1OP codifica FOP, una proteína asociada al centrosoma y a los microtúbulos implicada en la organización del material pericentriolar y en el anclaje de microtúbulos durante la mitosis. A través de interacciones con andamiajes centrosomales y la red del citoesqueleto, FOP contribuye a procesos como la progresión del ciclo celular, la dinámica del huso y el transporte intracelular. FGFR1OP se ha estudiado en el contexto de reordenamientos cromosómicos que involucran a FGFR1, lo que la vincula con señalización aberrante y con un comportamiento alterado de células hematopoyéticas. La desregulación de la función del centrosoma y de la organización de microtúbulos asociada a la biología de FOP también es relevante para fenotipos de inestabilidad genómica utilizados en modelos de investigación sobre cáncer y división celular.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO FOP (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen FGFR1OP en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del FGFR1OP junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de FGFR1OP tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína FOP.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en FGFR1OP para la investigación de la señalización de FOP, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de FGFR1OP críticos para la función de FOP
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de FGFR1OP para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido FOP CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido FOP CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus FGFR1OP. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR FOP (h) y el plásmido HDR FOP (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología FGFR1OP para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana FGFR1OP definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.