FLRT3 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406632

Übersicht

FLRT3 (fibronectin leucine-rich transmembrane protein 3) kodiert ein Single-Pass-Transmembranprotein, das während der Entwicklung als Signal für Zelladhäsion und -führung fungiert und dabei Zell-Zell-Interaktionen sowie das Auswachsen von Neuriten koordiniert. FLRT3 ist an Signalnetzwerken beteiligt, die FGF-Rezeptor-Signalwege und extrazelluläre Leitsignale wie UNC5-Rezeptoren umfassen, und beeinflusst dadurch Adhäsion, Repulsion und Gewebemusterbildung. Über diese Interaktionen trägt FLRT3 zur Regulation von Zellmigration, Synapsenbildung und Morphogenese in unterschiedlichen Gewebekontexten bei. Veränderte FLRT3-Expression und eine veränderte Verschaltung der zugehörigen Signalwege wurden in Studien zu neuroentwicklungsbiologischen Prozessen und zur Krebsbiologie beschrieben, was seine Nutzung als mechanistischen Knotenpunkt in der Adhäsions- und Migrationsforschung unterstützt.

Das FLRT3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des FLRT3-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des FLRT3-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von FLRT3 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die FLRT3-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von FLRT3-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der FLRT3-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf FLRT3-Exone abzielen, die für die FLRT3-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere FLRT3-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom FLRT3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom FLRT3 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des FLRT3-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das FLRT3 HDR-Plasmid (h) und FLRT3 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von FLRT3-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten FLRT3-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.