Plasmide CRISPR/Cas9 KO Fgl2 (m): sc-420346
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Fgl2 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Fgl2, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Fgl2 Antibody (4H5): sc-100276
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Fgl2 (m) | sc-420346 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Fgl2 (fibrinogen-like protein 2) est une protéine immunorégulatrice associée à la membrane et sécrétée, exprimée par les cellules endothéliales et les lignées myéloïdes, jouant un rôle dans l’hémostase et la signalisation inflammatoire. Chez la souris, Fgl2 contribue à l’activité prothrombinase qui relie la coagulation aux réponses immunitaires innées et adaptatives, en influençant les réseaux de cytokines et le recrutement des leucocytes au sein des tissus enflammés. Son expression est modulée en aval des signaux inflammatoires et a été étudiée dans des contextes tels que des modèles d’hépatite virale, le rejet de greffe et l’immunosuppression associée aux tumeurs. Ces fonctions font de Fgl2 une cible pertinente pour analyser les interactions entre les voies de coagulation, la régulation des macrophages et des lymphocytes T, et les réponses aux lésions tissulaires.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Fgl2 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Fgl2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Fgl2, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Fgl2 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Fgl2.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Fgl2 pour l'étude de la signalisation de Fgl2, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Fgl2 essentiels à la fonction de Fgl2
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Fgl2 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Fgl2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le Fgl2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Fgl2. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Fgl2 plasmide HDR (m) et le Fgl2 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Fgl2 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Fgl2 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.