Plásmido Doble Nickase (m) Ferroportin-1: sc-424774-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)Ferroportin-1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Ferroportin-1 (m) y el plásmido de doble nickasa Ferroportin-1 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Slc40a1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) Ferroportin-1 | sc-424774-NIC | 20 µg | $410.00 |
Slc40a1 codifica la ferroportina-1, el principal exportador celular de hierro, que controla la distribución sistémica y tisular del hierro al mediar el eflujo de Fe²⁺ desde enterocitos, macrófagos, hepatocitos y células placentarias. La actividad de la ferroportina está estrechamente regulada por el eje hepcidina–ferroportina, en el cual la unión de la hepcidina desencadena la internalización y degradación de la ferroportina, vinculando el flujo de hierro con señales inflamatorias y metabólicas. A través de su impacto en la disponibilidad de hierro, la ferroportina-1 influye en la eritropoyesis, la función mitocondrial, las respuestas al estrés oxidativo y el reciclaje de hierro por los macrófagos. La desregulación del manejo del hierro dependiente de Slc40a1 es relevante tanto en estados de sobrecarga de hierro como en estados de restricción de hierro, y con frecuencia se modela en estudios de anemia de la inflamación, metabolismo hepático del hierro, biología de infecciones y neuroinflamación.
Ferroportin-1 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Slc40a1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Slc40a1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Slc40a1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Slc40a1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.