Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Ferrochelatase 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-402043-NIC
- Target species: human
- 20 µg of transfection-ready, purified plasmid DNA; Suitable for up to 20 transfections
- Ferrochelatase Double Nickase Plasmid (h) 는 한쌍의D10A mutated Cas9 nuclease 와 타깃특정 20 nt guide RNA (gRNA)를 인코딩하는 plasmid를 포함하고있으며 gRNA는 대응 CRISPR/Cas9 KO보다 높은 특이성을 띤 knockout gene을 발현하도록 디자인되였습니다.
- 한쌍의 gRNA는 약 20bp가량 떨어져 있으며 이는 게놈DNA의 Cas9-mediated double nicking을 발생하여 DSB를 모방합니다.
- 한쌍의 plasmid 중 하나는 selection에 필요한 puromycin-resistance gene을, 다른하나는 형질주입효율을 확인하는 GFP marker를 보유하고있습니다.
- Ferrochelatase 더블 니케이스 플라스미드 (h) 및 Ferrochelatase 더블 니케이스 플라스미드 (h2)는 FECH을 표적하는 서로 다른 쌍을 이루는 gRNA 설계를 암호화합니다. 하나 또는 두 가지 디자인 모두 이용 가능할 수 있습니다
- Transfection, gene knockout효율은 WB, IF나 IHC등 방법으로 측정할수있습니다, 권장하는 항체는 Ferrochelatase Antibody (A-3): sc-377377
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
Ferrochelatase 더블 틈내기효소 플라스미드 (h) | sc-402043-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Ferrochelatase 더블 틈내기효소 플라스미드 (h2) | sc-402043-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
인간 FECH 유전자는 헤름 생합성의 말단 효소인 페로켈라타아제(ferrochelatase)를 암호화하며, 미토콘드리아 기질에서 프로토포르피린 IX에 2가 철(Fe²⁺)을 삽입해 헤름을 형성하는 반응을 촉매합니다. 이 활성은 헤모글로빈, 미오글로빈, 시토크롬, 카탈라아제, 일산화질소 합성효소 등의 보결분자단(prosthetic group)으로 쓰이는 헤름을 공급함으로써 산화적 대사를 뒷받침합니다. FECH 기능은 미토콘드리아 철 처리, 포르피린 대사, 산화환원 항상성과 통합되어 있어 세포 호흡과 활성산소종(ROS) 조절의 핵심 요소입니다. FECH의 조절 이상은 포르피린 축적과 헤름 결핍 양상과 연관되며, 적혈구형 프로토포르피린증(erythropoietic protoporphyria) 같은 유전성 포르피리아를 포함해 빈혈, 미토콘드리아 기능장애, 광과민성 관련 세포 스트레스 등의 맥락에서 연구되고 있습니다.
Ferrochelatase 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 FECH 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 FECH 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 FECH의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.
편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, FECH 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.