Partículas Lentivirales de Activación (h) FAM198B: sc-409269-LAC

FAM198B codifica una proteína secretada o luminal implicada en la regulación de la comunicación célula–matriz y la remodelación tisular, con vínculos descritos con la diferenciación epitelial y la señalización del microambiente. Estudios transcriptómicos y funcionales han asociado FAM198B con procesos como la adhesión celular, la migración y la organización de la matriz extracelular, lo que sugiere funciones en vías que modelan la polaridad celular y las interacciones intercelulares. Se han observado alteraciones en la expresión de FAM198B en múltiples contextos tumorales y estados del desarrollo, lo que respalda su utilidad como lectura molecular en estudios de invasión, interacciones con el estroma y regulación génica específica de linaje. Estas características hacen de FAM198B un objetivo relevante para el análisis mecanístico en biología del cáncer, señalización relacionada con la fibrosis y transiciones de estado celular.

Las partículas de activación lentiviral FAM198B (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de FAM198B en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral FAM198B (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción FAM198B, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de FAM198B. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo FAM198B y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.