FAM127B Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406247

Panoramica

FAM127B (family with sequence similarity 127 member B) codifica una proteina umana scarsamente caratterizzata, con annotazioni funzionali limitate, il che la rende di interesse per un’interrogazione genetica sistematica. Le evidenze disponibili suggeriscono ruoli nell’omeostasi cellulare e nei processi di regolazione genica, con potenziali connessioni a programmi di segnalazione e trascrizionali che influenzano la proliferazione e le risposte allo stress. Come per altri membri poco studiati della famiglia FAM, alterazioni dell’espressione o del numero di copie sono state riportate in sottogruppi di dataset relativi a malattie umane, a supporto di ulteriori indagini nel cancro e in altri fenotipi complessi. Analizzare la funzione di FAM127B può aiutare a chiarirne il contributo all’architettura delle vie di segnalazione, al mantenimento dello stato cellulare e a vulnerabilità dipendenti dal contesto.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO FAM127B (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene FAM127B in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del FAM127B insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto FAM127B a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina FAM127B.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di FAM127B per lo studio della segnalazione di FAM127B, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni FAM127B critici per la funzione di FAM127B
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di FAM127B per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal FAM127B CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal FAM127B CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus FAM127B. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal FAM127B Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR FAM127B (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia FAM127B per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio FAM127B definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.