Plasmide CRISPR/Cas9 KO FAM127B (h): sc-406247

Présentation

FAM127B (famille présentant une similarité de séquence 127, membre B) code une protéine humaine encore mal caractérisée et faisant l’objet d’une annotation fonctionnelle limitée, ce qui en fait une cible d’intérêt pour des analyses génétiques systématiques. Les données disponibles suggèrent des rôles dans l’homéostasie cellulaire et les processus de régulation génique, avec des liens possibles avec des programmes de signalisation et de transcription influençant la prolifération et les réponses au stress. Comme pour d’autres membres peu étudiés de la famille FAM, des altérations d’expression ou du nombre de copies ont été rapportées dans certains jeux de données de maladies humaines, ce qui justifie son exploration dans le cancer et d’autres phénotypes complexes. L’élucidation de la fonction de FAM127B peut aider à préciser sa contribution à l’organisation des voies de signalisation, au maintien des états cellulaires et aux vulnérabilités dépendantes du contexte.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO FAM127B (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène FAM127B dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du FAM127B, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert FAM127B à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine FAM127B.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en FAM127B pour l'étude de la signalisation de FAM127B, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de FAM127B essentiels à la fonction de FAM127B
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de FAM127B pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le FAM127B plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le FAM127B plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus FAM127B. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le FAM127B plasmide HDR (h) et le FAM127B (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie FAM127B pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles FAM127B définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.